◆ 说明
蛋白糖(英文名aspartame,又名阿斯巴甜)是由氨基酸组成的二肽类甜味剂。它具有类似蔗糖的甜味,不致龋,不致肥,无任何副作用,是保健食品、饮料等的低卡甜味剂。单纯测定蛋白糖或氨基酸的报道已有不少,而对蛋白糖的测定大多局限于对配制软饮料中单种蛋白糖成分或对食品添加剂如色素、防腐剂等成分的检测分析方面。考虑到在发酵乳制品中,氨基酸的种类及含量是常被检测用于评价其营养性能的重要指标,而蛋白糖在降解过程中也会产生一些氨基酸,为此,我们探讨了在测定氨基酸的同时测定蛋白糖含量的可能性。
◆ 分析条件
仪器:STI P5000梯度系统
色谱柱:Vertex AQ-C18,5μm,150mm×4.6mmI.D.
检测器:STI UV5000紫外检测器
流动相:流动相A:19.0 g NaAc·3H2O溶于1 L超净水中,加0.5 mL三乙胺,用冰醋酸调pH至6.40,脱气。洗脱液B:600 g/L乙腈。稀释液:710 mg Na2HPO4加超净水1 L,用100 g/L的V(磷酸)∶V(乙腈) =95∶5调pH值为7.4,过滤备用。
梯度程序:
时间(分钟) 流速(min) 流动相A(%V) 流动相B(%V)
0.5 1.0 90 10
10.5 1.0 49 51
16.5 1.0 0 100
17.0 1.0 0 100
17.5 1.5 0 100
18.0 1.5 90 10
23.0 1.5 90 10
23.5 1.0 90 10
柱温:28℃
检测波长:254 nm
流速:1.0 mL/min
◆ 谱图
PTC-氨基酸、PTC-蛋白糖、衍生试剂产物的色谱图
Chromatogram of amino acids,aspartame and derivatives
1.Asp, 2.Glu, 3.Ser, 4.Gly, 5.His, 6.Arg, 7.Thr,8.Ala, 9.Amonia, 10.Pro, 11.Tyr, 12.Val, 13.Met,14.Cys, 15.Ile, 16.Leu, 17.Phe, 18.Lys, 19.aspartame.
◆ 结论
用上海禾工VERTEX STI 5000梯度液相色谱仪同时测定发酵乳中的蛋白糖和氨基酸,方便,准确,快速。